الطرق المحتملة لتدهور الببتيد

تعتمد المقاومة الكيميائية للببتيدات على تكوين وتسلسل الأحماض الأمينية. الببتيدات المجففة بشكل عام أكثر متانة من نظيراتها في المحلول. طرق التحلل المحتملة للببتيدات هي كما يلي:

1 ، التحلل المائي: يتم تضمين هذا عادة في ASP في التسلسل (د) للمشكلة في الببتيد ، يمكن تجفيفه بسهولة شديدة لتشكيل حلقة متوسطة. على سبيل المثال ، هناك ASP في التسلسل. -Pro (DP) في هذه الحالة ، فإن الوسيط imide على شكل حلقة الناتج عن الحفز الحمضي سيؤدي إلى انشقاق سلسلة الببتيد. وبالمثل ، يوجد ASP-Gly (DG) في التسلسل ، وفي هذه الحالة يمكن تحلل الوسيط الدائري في وضع ASP الأصلي لحمض الأيزسبارتيك (غير ضار) أو تناظرية غير نشطة. أخيرًا ، يمكن تحويل جميع أنماط حمض الأسبارتيك بالكامل إلى نظائر حمض الأيزسبارتيك. "على مستوى أصغر ، يحتوي على Ser (s) ، وهو تسلسل يشكل أيضًا وسيطًا دائريًا يتوسط في نهاية المطاف سلسلة الببتيد."

2 ، deamidation: يحدث هذا التفاعل المحفز في الغالب في وجود ASN-Gly (NG) أو GLN-Gly (QG) في التسلسل ويتبع آلية تسلسل ASP-Gly (DG) مماثلة. العطل (فقدان الأمين) في تسلسل ASN-Gly يعطي وسيط Imide دوري ، والذي يتم تحلله بعد ذلك لإعطاء نظير حمض الأسبارتيك Asn أو أحماض Isoaspartic. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن أن يتسبب الوسيط الحلقي في الإيميد الدائري أو الإشارة الخارجية إلى ASND-ISO-شيء مشابه لـ ASP ، وكل ذلك قد يكون غير نشط.

3 ، الأكسدة: Cys و Met بقايا هي البقايا الرئيسية التي تخضع للأكسدة القابلة للانعكاس. يتم تسريع أكسدة السيستين في قيم الأس الهيدروجيني الأعلى ، حيث يزيل الثيول بسهولة أكبر من البروتون ويعرض لتوليد روابط ثاني كبريتيد في السلاسل أو بينها. يمكن عكس رابطة ثاني كبريتيد بسهولة عن طريق العلاج باستخدام dithiothreitol (DTT) أو TRIs (2-carboxylthylphosphine) hydrochloride (TCEP). يتأكسد الميثيونين عن طريق الكيمياء الكيميائية والكيميائية لإنتاج ثاني أكسيد الميثيونين ، مما يدخل ثاني أكسيد الميثيونين ، وكلاهما يصعب عكسه.

4 ، إنتاج Diketopiperazine وأحماض البيروجلوتاميك: عادة ما يحدث تكوين ثنائي ميثيل بيبيبيرازين عندما يكون Gly في الموضع الثالث من الطرف N ، خاصة إذا كان Pro أو Gly في الموضع 1 أو 2. طريقة diketopiperazine. من ناحية أخرى ، إذا كان GLN موجودًا في الطرف N ، فإن تكوين حمض البيروجلوتاميك أمر لا مفر منه تقريبًا. هذا رد فعل مماثل يهاجم فيه النيتروجين N-terminal الكربون القاعدة الجانبية لـ GLN لتشكيل جلسة التناظرية للببتيد البيروغلوتاميل. يحدث هذا التحويل أيضًا مع الطرف N الذي يحتوي على نظير الببتيد البيروغلوتامات.

5. ينطوي Racemization على تحويل الأحماض الأمينية من enantiomer المحفزة للقاعدة ، وعادة ما يكون L-form ، إلى النوع 1 من enantiomers L و D. : 1. خليط. هذا أكثر أهمية أثناء توليد الببتيد ، ولكنه أقل مشكلة في الببتيد النهائي. بالإضافة إلى ذلك ، من الصعب اكتشاف المفتاح ولا يمكن التحكم فيه.

يتمثل النهج العام لتجنب أو تقليل تدهور الببتيد في تدهور الببتيد إلى-20 درجة مئوية أو أفضل-80 درجة مئوية للتخزين المجفف بالتجميد ، إذا كان ذلك متاحًا. إذا كان الببتيد في محلول مائي ، فيجب تجميد كل عينة من قسامة لتجنب التجميد والذوبان. يجب تجنب التعرض لدرجة الحموضة و GT ؛ متوسط ​​8. ومع ذلك ، إذا كان PH & GT مطلوبًا ؛ إذا ذوبان الببتيد في 8 ، فيجب أن يكون تعرضه ضئيلًا.