كاشف ليمولوس ثلاثي الببتيد عبارة عن مادة ثلاثية الببتيد ذات تسلسل محدد مستخرج من محلول خلايا دم سرطان حدوة الحصان أو يتم تصنيعه بشكل مصطنع. كاشف ليمولوس ثلاثي الببتيد هو ركيزة مولدة للون تستخدم للتحليل الكمي (مثل اختبار السموم الداخلية البكتيرية) لاكتشاف وقياس مكونات البكتيريا سالبة الجرام—السموم الداخلية. عندما يتم تفعيلها بواسطة الإنزيمات التي تنشطها السموم الداخلية، يتم إطلاق مركب ملون (مثل p-nitroaniline)، مما يسمح بقياس كثافة اللون وربطها بمحتوى السموم الداخلية.
مبدأ العمل
تنشيط السموم الداخلية: في وجود السموم الداخلية، تطلق الخلايا الأميبية الموجودة في دم سرطان حدوة الحصان الإنزيمات، مما يؤدي إلى تحفيز سلسلة التخثر.
عمل الإنزيم: يعمل الإنزيم المنشط (عادةً إنزيم التخثر) على الركيزة الملونة.
التفاعل اللوني: يشق الإنزيم الركيزة، ويطلق مركبًا أصفر اللون يسمى p-nitroaniline (pNA).
التحليل الكمي: تتناسب شدة اللون الأصفر مع محتوى الذيفان الداخلي في العينة ويتم قياسه عادة باستخدام مقياس الطيف الضوئي عند امتصاص 405 نانومتر.
طرق التحضير
يمكن الحصول على ثلاثي الببتيد كاشف ليمولوس من خلال طريقتين من حيث التحضير.
1. استخلاص المكونات الطبيعية من خلايا دم الليمولوس والحصول على ثلاثي الببتيد النشط من خلال الفصل والتنقية.
2. استخدام تقنية تركيب الطور الصلب لربط تسلسلات محددة من الأحماض الأمينية بشكل تسلسلي، والتحكم بدقة في بنية ثلاثي الببتيد.
نظرًا لسياسات الحفاظ على ليمولوس (مع إدراج مقاطعات مثل تشجيانغ وفوجيان وقوانغدونغ وقوانغشي على أنها "حياة برية مائية محمية رئيسية في المقاطعة" / أصدرت هونغ كونغ لوائح في نهاية عام 2012 تحظر الصيد بشباك الجر في القاع)، ولأن عملية الاستخراج معقدة وصعبة، فإن تكلفة الطريقة الأولى مرتفعة نسبيًا. لذلك، يتم الآن استخدام تخليق الطور الصلب بشكل شائع. من خلال ربط تسلسلات محددة من الأحماض الأمينية بشكل تسلسلي، يمكن التحكم بدقة في بنية ثلاثي الببتيد. لا تضمن هذه الطريقة استقرار المنتج واتساقه فحسب، بل تسمح أيضًا بالإنتاج على نطاق واسع، مما يلبي احتياجات صناعة المستحضرات الصيدلانية لاختبار الكواشف.
وقت النشر: 2025-11-04