فهم الببتيد حمض الفوسفوريك

إنه يلعب دورًا مهمًا في عمليات الحياة، حيث يقوم بتفسفر Tyrr، Ser، Thr، الموجود على الببتيدات.يستخدم الحمض الأميني المفسفر بشكل شائع في إنتاج ببتيد حمض الفوسفوريك، المستخدم حاليًا في الأحماض الأمينية الفسفورية المفردة بالفينيل.تُستخدم الأحماض الأمينية HBTU/المفسفرة بشكل شائع لتوصيل الأحماض الأمينية المفسفرة بطريقة HOBt/DIEA، لكن ببتيد حمض الفوسفوريك يختار عيوب هذا النهج، خاصة في الببتيدات الببتيدية الأطول بكثير أو فوسفات الأحماض الأمينية، مما يجعل توصيل الكفاءة منخفضًا ومنخفضًا نقاء المنتج النهائي.بالنسبة لهذا الفسفوببتيد، نظرنا في نهج انتقائي بعد الفسفرة.عملية التوليد هي الإزالة الانتقائية لمجموعات الحماية ذات السلسلة الجانبية للأحماض الأمينية التي يجب تصنيفها بعد تخليق الببتيد.بالنسبة لـ Tyr، يمكن أن يتفاعل Thr مباشرة باستخدام الأحماض الأمينية ذات السلاسل الجانبية غير المحمية.-Ser (trt)، تمت إزالته كميًا في بيئة 1% TFA /DCM.

يتم إنشاء الفسفرة، مع فسفوراميد البنزين المزدوج وأربعة نيتروجين وفوسفوراميد تيترازوليوم وسيط نشط، متصل بالهيدروكسي، ثم تحت تكوين فوسفوريل أكسدة بيروكسيد الحمض، تفاعل كامل.

في الوقت الحاضر، طريقة تعديل الببتيد المفسفرة هناك نوعان رئيسيان:

(1) الإدخال المباشر للأحماض الأمينية الفسفورية المضمونة بشكل معتدل في تسلسل البولي ببتيد؛

(2) بعد الراتنج المتولد على تسلسل الببتيد، إلى فسفرة Ser أو Tyr أو Thr من هيدروكسيل السلسلة الجانبية.

1) سيضمن بشكل معتدل أن الأحماض الأمينية المفسفرة تقدم مباشرة تسلسل الببتيد:

أي أن الأحماض الأمينية التي تحتاج إلى الفسفرة سيتم فسفرتها وحمايتها بشكل مناسب مسبقًا باستخدام (Thr أو Ser أو Tyr)، وبعد ذلك سيتم تضييق الفسفرة إلى نقطة اختيار مؤشر البولي ببتيد بناءً على عملية توليد SPPS العادية .هذه الطريقة سهلة التشغيل، وقد أصبحت الطريقة الرئيسية لتعديل فسفرة شركات الببتيد.

2) بعد الراتنج المتولد على تسلسل الببتيد، إلى السلاسل الجانبية Ser hydroxy الفسفرة، Tyr، أو Thr:

زخرفة الفسفرة باستخدام فسفرة انكماش واحد في طريقة البولي ببتيد، بسبب العائق الاستاتيكي الناتج عن مجموعات كبيرة في زخرفة السلسلة الجانبية، من الصعب أن يتقلص فسفرة الأحماض الأمينية مع سلسلة الببتيد.في المستقبل، سيكون إدخال الأحماض الأمينية أكثر صعوبة، خاصة في الزخرفة التي تحتوي على مواقع فسفرة متعددة، وسيصبح الجيل صعبًا للغاية، وتكوين المنتج النهائي معقد، ويصعب فصله، والعائد منخفض للغاية.

لذلك، عندما يتم فسفرة مواقع متعددة في سلسلة الببتيد، يمكن للمرء اختيار توليد تسلسل الببتيد على الراتينج ثم فسفرته بواسطة مجموعة الهيدروكسيل ذات السلسلة الجانبية من Ser أو Tyr أو Thr: يتضمن توليدها بشكل أساسي الإزالة الانتقائية للـ مجموعة حماية السلسلة الجانبية التي تتطلب التعرف على الأحماض الأمينية بعد تخليق الببتيد.بالنسبة لـ Tyr، يمكن لـ Thr استخدام السلاسل الجانبية للأحماض الأمينية بشكل مباشر غير محمية ردًا على ذلك.

قاعدة حماية السلسلة الجانبية 1% TFA/DCM يمكن إزالتها كميًا.عندما يتم اختيار هذه الطريقة، يمكن إنشاء وسيط نشط فوسفورميديت تيترازوليوم باستخدام ثنائي بنزيل فوسفوراميديت وتترازوليوم، مرتبط بمجموعة هيدروكسيل، ثم أكسدته لتكوين مجموعة فسفوريل في بيئة بيروكسي أسيد لإكمال التفاعل.