الأكثر عرضة لفشل HPLC وحلولها

كأداة عالية الدقة، يمكن أن يؤدي HPLC بسهولة إلى بعض المشاكل الصغيرة المزعجة إذا لم يتم تشغيله بالطريقة الصحيحة أثناء الاستخدام.إحدى المشاكل الأكثر شيوعًا هي مشكلة ضغط الأعمدة.كيفية استكشاف أخطاء الكروماتوغراف الخاطئ وإصلاحها بسرعة.يتكون نظام HPLC بشكل أساسي من زجاجة خزان ومضخة وحاقن وعمود وغرفة درجة حرارة العمود وكاشف ونظام معالجة البيانات.بالنسبة للنظام بأكمله، تعتبر الركائز والمضخات وأجهزة الكشف هي المكونات الرئيسية والمواقع الرئيسية المعرضة للمشاكل.

مفتاح ضغط العمود هو المنطقة التي تحتاج إلى اهتمام وثيق عند استخدام HPLC.يرتبط استقرار ضغط العمود ارتباطًا وثيقًا بشكل الذروة الكروماتوغرافي وكفاءة العمود وكفاءة الفصل ووقت الاحتفاظ.لا يعني استقرار ضغط العمود أن قيمة الضغط مستقرة عند قيمة ثابتة، بل يعني أن نطاق تذبذب الضغط يتراوح بين 345 كيلو باسكال أو 50 رطل لكل بوصة مربعة (مما يسمح باستخدام الشطف المتدرج عندما يكون ضغط العمود مستقرًا ويتغير ببطء).يعد الضغط المرتفع جدًا أو المنخفض جدًا مشكلة في ضغط العمود.

الأكثر عرضة لفشل HPLC وحلولها

1، الضغط العالي هو المشكلة الأكثر شيوعا في استخدام HPLC.وهذا يعني ارتفاع مفاجئ في الضغط.بشكل عام هناك الأسباب التالية: (1) بشكل عام، يرجع ذلك إلى انسداد قناة التدفق.عند هذه النقطة، ينبغي لنا أن نفحصها جزئيا.أ.أولاً، قم بقطع مدخل مضخة التفريغ.عند هذه النقطة، تم ملء أنبوب النظرة الخاطفة بالسائل بحيث كان أنبوب النظرة الخاطفة أصغر من زجاجة المذيب لمعرفة ما إذا كان السائل يقطر حسب الرغبة.إذا لم يقطر السائل أو كان يقطر ببطء، فهذا يعني أن رأس مرشح المذيبات مسدود.العلاج: ينقع في حامض النيتريك 30% لمدة نصف ساعة ثم يشطف بالماء عالي النقاوة.إذا كان السائل يقطر بشكل عشوائي، فإن رأس مرشح المذيبات طبيعي ويتم فحصه؛ب.افتح صمام التطهير حتى لا يمر الطور المتحرك عبر العمود، وإذا لم ينخفض ​​الضغط بشكل كبير، يتم حظر الرأس الأبيض للمرشح.العلاج: تمت إزالة الرؤوس البيضاء المفلترة وصوتنة باستخدام 10% من الأيزوبروبانول لمدة نصف ساعة.على افتراض أن الضغط ينخفض ​​إلى أقل من 100PSI، فإن الرأس الأبيض المفلتر طبيعي ويتم فحصه؛ج.قم بإزالة طرف الخروج من العمود، إذا لم ينخفض ​​الضغط، يتم حظر العمود.العلاج: إذا كان هناك انسداد ملحي عازل، اشطفه بنسبة 95% حتى يصبح الضغط طبيعيًا.إذا كان سبب الانسداد بعض المواد الأكثر حفظًا، فيجب استخدام تدفق أقوى من الطور المتحرك الحالي للاندفاع نحو الضغط الطبيعي.إذا لم ينخفض ​​ضغط التنظيف على المدى الطويل وفقًا للطريقة المذكورة أعلاه، فيمكن اعتبار مدخل ومخرج العمود متصلين بالجهاز على العكس من ذلك، ويمكن تنظيف العمود بالطور المتحرك.في هذا الوقت، إذا لم يتم تقليل ضغط العمود، فلا يمكن استبدال لوحة غربال مدخل العمود إلا، ولكن بمجرد أن تكون العملية غير جيدة، فمن السهل أن تؤدي إلى تقليل تأثير العمود، لذا حاول استخدام أقل.بالنسبة للمشاكل الصعبة، يمكن النظر في استبدال العمود.

(2) إعداد معدل التدفق غير الصحيح: يمكن إعادة ضبط معدل التدفق الصحيح.

(3) نسبة التدفق غير الصحيحة: يختلف مؤشر اللزوجة بنسب مختلفة من التدفقات، ويكون ضغط النظام المقابل للتدفق ذو اللزوجة الأعلى أكبر أيضًا.إذا أمكن، يمكن استبدال المذيبات ذات اللزوجة المنخفضة أو إعادة ضبطها وتحضيرها.

(4) ضغط النظام صفر الانجراف: اضبط الصفر لمستشعر مستوى السائل.

2، والضغط منخفض جدا (1) عادة ما يكون سببه تسرب النظام.ما يجب فعله: ابحث عن كل اتصال، وخاصة الواجهة الموجودة على طرفي العمود، وقم بتشديد منطقة التسرب.قم بإزالة الدعامة وشد أو ربط طبقة PTFE بالقوة المناسبة.

(2) يدخل الغاز إلى المضخة، ولكن الضغط عادة ما يكون غير مستقر في هذا الوقت، مرتفع ومنخفض.والأخطر من ذلك أن المضخة لن تكون قادرة على امتصاص السائل.طريقة العلاج: افتح صمام التنظيف ونظفه بمعدل تدفق 3 ~ 5 مل/دقيقة.إذا لم يكن الأمر كذلك، تم استنشاق فقاعات الهواء عند صمام العادم باستخدام أنبوب إبرة مخصص.

(3) لا يوجد تدفق للطور المتحرك: تحقق مما إذا كانت هناك مرحلة متنقلة في زجاجة الخزان، وما إذا كان الحوض مغمورًا في الطور المتحرك، وما إذا كانت المضخة تعمل.

(4) الصمام المرجعي غير مغلق: يتم إغلاق الصمام المرجعي بعد التباطؤ.وعادة ما ينخفض ​​إلى 0.1.~ 0.2 مل / دقيقة بعد إغلاق الصمام المرجعي.

ملخص:

في هذه الورقة، يتم تحليل المشاكل الشائعة فقط في اللوني السائل.وبالطبع سنواجه المزيد من المشاكل الأخرى في تطبيقنا العملي.في التعامل مع الأخطاء، يجب علينا اتباع المبادئ التالية: تغيير عامل واحد فقط في كل مرة لتحديد العلاقة بين العامل الافتراضي والمشكلة؛بشكل عام، عند استبدال الأجزاء لاستكشاف الأخطاء وإصلاحها، يجب الانتباه إلى إعادة الأجزاء السليمة المفككة إلى مكانها مرة أخرى لمنع الهدر؛إن تكوين عادة تسجيل جيدة هو مفتاح نجاح التعامل مع الأخطاء.في الختام، عند استخدام HPLC، من المهم الانتباه إلى المعالجة المسبقة للعينة والتشغيل السليم وصيانة المعدات.