غالبًا ما تحتوي مستضدات البروتين المؤتلف على عدة حلقات مختلفة ، بعضها عبارة عن حلقات تسلسل وبعضها حلقات هيكلية. الأجسام المضادة متعددة النسيلة التي تم الحصول عليها من قبل الحيوانات المحصنة مع المستضدات المشوهة هي مخاليط من الأجسام المضادة المحددة للحلقات الفردية ويمكن استخدامها بشكل عام للكشف عن الهياكل الطبيعية أو البروتينات المستهدفة المشوهة. تتمثل الفائدة الجانبية لاستخدام البروتينات المشوهة في مناعة المناعة في أن البروتينات المشوهة تميل إلى أن تكون أكثر مناعية ويمكن أن تحفز الاستجابة المناعية القوية في الحيوانات.
عادة ما يتم اختيار نظام التعبير في الإشريكية القولونية لأغراض المستضد لأنه النظام الأكثر تكلفة من حيث الوقت والمال. من أجل تحسين إمكانية تعبير البروتين المستهدف وراحة التنقية ، يتم التعبير عن جزء صغير فقط من البروتين المستهدف ، مثل مجال معين.
التركيب ثلاثي الأبعاد للبروتينات
المجال المحدد للبروتين
إذا كان الغرض من تحضير الأجسام المضادة هو فقط للكشف عن WB ، فمن الاقتصادي وسريع استخدام الببتيد الصغير الاصطناعي كمستضد ، ولكن هناك خطر من الضعف المناعي أو عدم التجميع بسبب اختيار غير مناسب لقطاع الببتيد. نظرًا لأن تحضير الأجسام المضادة يتطلب فترة طويلة ، يتم اختيار اثنين أو ثلاثة قطاعات ببتيد مختلفة غالبًا لإعداد الأجسام المضادة باستخدام مستضد الببتيد لضمان معدل نجاح التجربة.
يلزم أن تكون نقاء مستضد بولي ببتيد للتحصين أكبر من 80 ٪. على الرغم من أن نقاءًا أعلى يمكن أن يحصل نظريًا على أجسام مضادة ذات خصوصية أفضل ، في الممارسة العملية ، فإن الحيوانات تنتج دائمًا عددًا كبيرًا من الأجسام المضادة غير المحددة ، مما يخفي فوائد نقاء المستضد.
بالإضافة إلى ذلك ، يجب أن يكون إعداد الأجسام المضادة من الببتيدات الصغيرة متشابكة إلى مستضد الناقل المناسب لتعزيز المناعة. اثنان من شركات النقل المستضد الشائعة هما KLH و BSA.
وقت النشر: 2025-07-03